Страница 58 из 107
После того как мы вырезали ген флуоресцентного белка из вектора и провели электрофорез полученной смеси, мы увидим на геле две полоски ДНК. Наш ген имеет длину всего около шестисот нуклеотидов, он гораздо короче, чем оставшийся вектор. Вырезаем нужную нам полоску геля и выделяем из нее ДНК.
Промоторы
Теперь, когда у нас в руках находится лишенный примесей ген, от работы с мышью нас отделяет всего один шаг — к этому гену надо присоединить промотор, с которого клетки мыши смогут начинать чтение РНК. Мы используем универсальный CMV-промотор, полученный из цитомегаловируса, — такой промотор работает во всех млекопитающих. Для этого мы повторим уже знакомые нам процедуры — клонируем ген в вектор, содержащий перед полилинкером CMV-промотор, а потом вместе с промотором вырежем обратно.
Все готово, идем ловить мышь. Этап второй — внедрение гена в геном мыши
Процедура создания трансгенной мышки короче в описании, чем клонирование нового гена, однако времени она займет больше. Нам придется подождать по меньшей мере три недели, пока трансген родится — беременность у мышей длится двадцать один день. Кроме того, эта работа опаснее (мышь может укусить) и более кровавая — животным придется делать хирургические операции.
Дадим беременной самке эфирный наркоз и аккуратно извлечем из яйцевода одноклеточные эмбрионы (зиготы). Нам нужна самая ранняя стадия эмбрионального развития, когда сперматозоид уже слился с яйцеклеткой, но их клеточные ядра еще плавают внутри зиготы по отдельности. Помещаем зиготу под микроскоп и инъецируем раствор ДНК в одно из ядер. Нам потребуется микроинъектор — объем впрыскиваемой жидкости не превышает одного пиколитра. Иглу для микроинъекции мы сделаем сами из тонкого стеклянного капилляра. Для этого капилляр закрепляется в специальном устройстве, которое нагревает его посередине и резко дергает за концы. Вытянувшийся кончик иголки так тонок, что им можно проткнуть клеточное ядро, только придется воспользоваться микроманипулятором — наши руки не приспособлены для столь тонких операций.
Теперь нам нужна еще одна самка, которая станет суррогатной матерью. Остается только подсадить инъецированные зиготы к ней в яйцеводы и подождать — через три недели родится первая сделанная нашими руками трансгенная мышка, ярко светящаяся зеленым светом при помещении в детектор валют.
Часть процедур, без которых можно было обойтись, я опустил, но, вообще говоря, большинство молекулярных биологов без них не обходятся. В идеале на вышеописанную работу требуется месяца полтора, однако даже в хорошо оснащенных лабораториях с опытными сотрудниками на все про все уйдет не меньше года. Минимальную стоимость необходимого оборудования и реактивов можно оценить в 15–20 тысяч долларов; впрочем, работать в таких спартанских условиях будет нелегко. Для комфорта хорошо бы потратить раз в десять больше.
ХРОНИКА
Китайцы вывели трёх частично светящихся поросят
Михаил Карпов
9 января 2007 года
Китайским учёным удалось вывести частично светящихся в темноте зелёным светом свиней, сообщает агентство Reuters (http://today.reuters.com). Данный эксперимент является частью исследований стволовых клеток. Три трансгенные свиньи, полученные исследователями Северо-восточного сельскохозяйственного университета в Харбине в провинции Хэйлунцзян были выведены благодаря введению флюоресцентного зелёного протеина в эмбрионы.
По словам руководителя группы учёных, профессора Лю Чжунхуа, рот, копытца и язык этих свиней светятся в ультрафиолетовом излучении. Он также рассказал, что в чрево свиноматки был введён генетический материал медузы. В результате, 114 дней назад в Харбине родились три светящихся поросёнка.
Интересно, что в начале прошлого года подобные эксперименты проводили и тайваньские учёные. Им удалось вывести свиней, вся шкура и внутренности которых светились. Стоит также отметить, что попытки создания флюоресцентных свиней предпринимались и ранее.
Художник? — Значит, террорист
Миловзорова Н.
11.06.2004
Бен Ладен совершил террористически-художественный акт, а Майкл Мур — художественно-террористический. Связь между двумя сферами, скажем так, деятельности укрепилась в американском сознании настолько, что когда работающий с биотехнологиями художник Стивен Кёрц вызвал медпомощь, обнаружив, что его жена скоропостижно скончалась, он вместе со своими произведениями был немедленно арестован по подозрению в терроризме.
Однажды вечером художник Стивен Кёрц (Steven Kurtz) заснул женатым преподавателем искусства Университета Баффало, штат Нью-Йорк. Утром следующего дня он проснулся овдовевшим, а к полудню вместе со своими работами оказался задержан ФБР по подозрению в биотерроризме (Guardian). В скором времени состоится первое заседание суда.
46-летний Кёрц, состоящий в художественной группе Critical Art Ensemble, декларирующей "исследования общей территории искусства, технологий, радикальной политики и критической теории", использовал в своих работах генетические исследования. Так, в 2002-м он выставил "Молекулярное нашествие" — биоэкспонаты (растущая в специальных световых шкафах соя, чашки Петри с размножающимися бактериями и пр.) в знак протеста против генетически модифицированных продуктов.
Именно домашняя лаборатория Кёрца с оборудованием, предназначенным для работы с ДНК, и несколько видов разводимых бактерий и внушили подозрения приехавшей мед. бригаде, которая, в свою очередь, вызвала подразделение по борьбе с терроризмом Joint Terrorism Task Force. Книги, компьютер и художественные произведения Кёрца были конфискованы. ФБР не комментирует подготовку к процессу, но более чем вероятно, что художник предстанет перед судом не в связи со смертью жены (умершей от сердечной недостаточности), а по обвинению в намерении создания биологического оружия с целью террористических действий. Статья 175 Анти-террористического акта США по биологическому оружию (1989), подтвержденная Патриотическим актом, запрещает владение "оборудованием для работы с биологическими агентами или токсинами в случае, если оно не оправдано внушающими доверие исследованиями, проводимыми в мирных целях".
В защиту Кёрца выступили соратники по Critical Art Ensemble и коллеги, в том числе руководитель кафедры искусств Университета Баффало. Они, как и адвокат Кёрца, считают арест художника последствием общественной "паранойи 9/11" и выразили недоумение тем, что сам факт использования биологии в искусстве может привести такое искусство на скамью подсудимых.
ЛАБОРАТОРИЯ
Выращивание грибов. Советы начинающим
Мудрость, рожденная в простом
Terri Marie Beausejour
Если перспектива выращивания собственных грибов окрылила вас, то первые же попытки, скорее всего, повергли в уныние в связи со сложностью и потенциальной дороговизной таких вещей, как "стерильные технологии," "чистые помещения", "ламинарные боксы" и "агаровые питательные среды".
А может быть вы, будучи склонны к исследованиям, проделали немалую работу, героически пытаясь отделить чистые культуры мицелия, и все лишь для того, чтобы увидеть, как нежный белый мицелий расцветает всеми цветами радуги, благодаря пушистым спорам плесени, или превращается в лоснящиеся лужицы жидкости в связи с бактериальным заражением.