Страница 2 из 2
Клетки. В работе с вирусами использовали следующие перевиваемые культуры клеток: для вируса полиомиелита – клетки почки зеленых мартышек Vero, аденовируса – линию клеток человека HeLa, для ВИЧ – лимфобластоидные клетки человека МТ-4, для вируса гепатита С – культуру клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ), для вируса гриппа А человека – клетки почки собаки (MDCK). Для работы с вирусом простого герпеса использовали культуру клеток Vero и культуру диплоидных фибробластов человека М-19.
Структура исследования. Вирулицидный эффект испытуемых средств исследовали в суспензионном тесте (тест in vitro) и на различных тест-объектах, являющихся реальными объектами приложения средства или суррогатными аналогами. Основными способами обработки контаминированных вирусом тест-объектов были протирание, орошение и погружение. Суспензионный тест является исторически исходным тестом выявления вирулицидных свойств дезинфектанта и заключается в смешивании вируса с испытуемым средством в соотношении 1:9 (по отечественным нормативам) или 1:8 (в зарубежной практике) [3, 5].
Чувствительные культуры клеток инфицировали вирусом, подвергшимся воздействию ДС; инкубировали их при оптимальной температуре и определяли наличие или отсутствие инфекционного вируса. Контролями служили пробы вируса, собранные с контаминированных вирусом тест-объектов, не подвергшихся действию дезинфицирующих средств. Репродукцию вируса в клетках оценивали по вирусиндуцированному цитопатическому эффекту микроскопическим или МТТ-методом.
Критерии учета результатов испытаний: эффект вирулицидного действия ДС оценивали по степени ингибирования инфекционного вируса, измеряемого в lg ТЦИД50 (50 %-я тканевая цитопатическая инфекционная доза). Критерием эффективности является степень ингибирования репродукции вируса, которая должна быть не менее 4,0 lg ТЦИД50.
Расчет концентрации ДВ в растворе проводили по формуле:
Х = (С × М)/100,
где Х – искомая концентрация ДВ в растворе, %; С – концентрация рабочего раствора по препарату, рекомендованная в инструкции, %; М – количество ДВ в средстве, указанное в Инструкции по применению, % [6].
3. Результаты исследования
3.1. Катионные поверхностно-активные вещества
Катионные поверхностно-активные вещества (КПАВ) представляют большую группу веществ, для которых общим является наличие крупного положительно заряженного катионного компонента, обладающего гидрофобностью, и мелкого отрицательно заряженного анионного в виде хлорида, бромида или сульфата, обладающего гидрофильностью. Общим свойством для этой группы веществ является изменение поверхностного натяжения воды и образование мицелл при определенной концентрации.
Среди этой группы антимикробную активность проявляют соли четвертичных аммониевых соединений (ЧАС), производные гуанидина, третичные амины [7, 8].
Дезинфицирующие средства часто встречаются в практике в виде комбинации двух или трех представителей КПАВ.
Вирулицидные свойства дезинфицирующих средств на основе смесей ЧАС, третичного амина или гуанидина в суспензионном тесте представлены в табл. 1. При суммарной концентрации действующих веществ в широком диапазоне от 0,12 до 1,0 % в суспензионном тесте при времени воздействия 60 минут степень ингибирования вируса полиомиелита составляла от 2,0 до 3,0 lg ТЦИД50. Это свидетельствует об их недостаточной эффективности в отношении безоболочечных вирусов даже при высоких концентрациях катионных поверхностно-активных веществ.
Таблица 1
Дезинфицирующие средства на основе смесей четвертичных аммониевых соединений распространены в практике профилактической дезинфекции в лечебно-профилактических учреждениях, на объектах коммунального хозяйства и пищевой промышленности.
Четвертичные аммониевые вещества – соединения, у которых 4 валентности азота заняты алкильными или гетероциклическими радикалами определенного размера или длины цепи (R1–R4), а пятая валентность занята галогенидом, сульфатом или подобными радикалами [9, 10].
Наибольшее практическое значение имеют алкилбензилдиметиламмоний хлорид, смесь равных частей алкилбензилдиметиламмоний хлорида с алкилдиметилбензиламмоний хлоридом, диоктилдиметиламмоний хлорид, дидецилдиметиламмоний хлорид, смесь октилдецилдиметиламоний хлорида (50 %) с диоктилдиметиламмоний хлоридом (25 %) и дидецилдиметиламмоний хлоридом (25 %).
Антимикробное свойство ЧАС проявляется в отношении бактерий, некоторых грибов и обусловлено инактивирующим действием на ферменты, денатурацией основных клеточных белков и нарушением проницаемости мембраны клетки [11].
Для средств этой группы отмечают такие положительные качества, как хорошая растворимость, наличие моющего, антикоррозионного и антистатического действия, стабильность при хранении. Материалы из натурального хлопка способны поглощать четвертичные аммониевые соединения на своей поверхности, что приводит к снижению концентрации рабочего раствора более чем в 2 раза и соответствующему снижению микробиологической эффективности [12].
В литературе описаны случаи микробной контаминации, особенно грамотрицательной микрофлорой, растворов ЧАС [13, 14].
Вирулицидные свойства дезинфицирующих средств на основе одного или смесей нескольких ЧАС представлены в табл. 2.
Таблица 2
Примечание:
Б – вирусы без оболочки вириона;
О – вирусы с липидной оболочкой вириона;
н. э. – не эффективны (снижение титра вируса менее 4,0 lg ТЦИД50);
эф. – снижение титра вируса 4,0 lg ТЦИД50
Конец ознакомительного фрагмента.
Текст предоставлен ООО «ЛитРес».
Прочитайте эту книгу целиком, купив полную легальную версию на ЛитРес.
Безопасно оплатить книгу можно банковской картой Visa, MasterCard, Maestro, со счета мобильного телефона, с платежного терминала, в салоне МТС или Связной, через PayPal, WebMoney, Яндекс.Деньги, QIWI Кошелек, бонусными картами или другим удобным Вам способом.